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第三方檢測PCR實驗室施工規(guī)范

  • Jason Peng

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  • 2022-06-26  |  Visits:


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PCR實驗室,也稱作臨床醫(yī)學(xué)基因擴(kuò)增實驗室,是技術(shù)專業(yè)用以檢驗HIV、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染病癥的實驗室。小譜整理了PCR實驗室基本建設(shè)標(biāo)準(zhǔn),并在原文中另附PCR實驗室儀器設(shè)備設(shè)備清單,供大家參考~PCR法可將病毒感染身體內(nèi)所含遺傳基因進(jìn)行增加,從而檢測病毒感染者人體是否帶有特殊病毒性感染。該檢測方法具有敏感度高、非特異高、便捷性強(qiáng)、對樣品要求不高優(yōu)點,因此被普遍認(rèn)可。PCR試驗已被普遍使用于疾病診斷,各疫防檢測單位的禽疫病確診。但是,這類試驗規(guī)定有安全系數(shù)的地理環(huán)境,合理配備的實驗室,規(guī)范化的實驗室為必要條件。近幾年來,PCR實驗室的基本建設(shè)越來越規(guī)范化,十分重視。

一.PCR實驗室試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)操作規(guī)范

PCR實驗室試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)操作規(guī)范
實驗區(qū)的主要操作是儲存試劑的制備、試劑的分包裝和主反應(yīng)混合物的制備。用于標(biāo)本生產(chǎn)的試劑和材料應(yīng)直接運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域,不得通過其他區(qū)域。試劑原料必須儲存在該區(qū)域,并制備所需的儲存試劑。這個區(qū)域?qū)饬鲏毫Φ目刂茮]有嚴(yán)格的要求。該地區(qū)的主要操作是保存臨床標(biāo)本和核酸(RNA、DNA)提取、存儲和添加到擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成。區(qū)域的壓力梯度要求為:相對于相鄰區(qū)域的正壓,以避免從相鄰區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域的氣溶膠污染。此外,由于在樣品添加過程中可能會發(fā)生氣溶膠污染,因此應(yīng)避免在該區(qū)域不必要的行走。

PCR實驗室效果圖 PCR實驗室效果圖
   

二.PCR實驗室臨床檢驗操作規(guī)范

PCR實驗室臨床檢驗操作規(guī)范
實驗室應(yīng)根據(jù)以下內(nèi)容制定和完成傳染性廢物的管理程序:
1.1指定專人負(fù)責(zé)和協(xié)調(diào)傳染性廢物的管理。
1.2.確定傳染性廢物的產(chǎn)地,確定廢物的成分和數(shù)量。
1.3建立隔離、包裝、轉(zhuǎn)運(yùn)、保存和處置程序。
1.4相關(guān)操作要求文件化,應(yīng)有記錄。
2.操作傳染性廢物
2.1隔離
有關(guān)單位必須確定實驗室可能產(chǎn)生的傳染性廢物,并采取安全、有效、經(jīng)濟(jì)的措施
濟(jì)的隔離和處理方法。傳染性廢物一旦分離,必須由專業(yè)人員嚴(yán)格區(qū)分。
2.2銳利物
鋒利的物品包括針頭、刀和任何可以穿透聚乙烯袋的物品。實驗室應(yīng)盡量減少使用能夠產(chǎn)生鋒利物體的物品。使用起皺的包裝材料包裝易碎玻璃和塑料制品,并在包裝中添加吸附材料。針或刀應(yīng)存放在有明顯標(biāo)記的容器中,以防止泄漏和穿刺。
2.3標(biāo)簽
已確認(rèn)的傳染性廢物應(yīng)分類并扔進(jìn)垃圾袋,所有收集傳染性廢物的容器都應(yīng)有 生物危害標(biāo)志,并使用紅色或黃色容器。含有尖銳物體的容器應(yīng)隨時標(biāo)記 生物危害。所有運(yùn)輸未經(jīng)處理的傳染性廢物的容器都應(yīng)有 生物危害標(biāo)志。
2.4包裝
所有傳染性廢物必須包裝,并應(yīng)根據(jù)廢物的性質(zhì)和數(shù)量選擇合適的包裝材料。應(yīng)使用紅色或橙色聚乙烯或聚丙烯包裝袋,并應(yīng)標(biāo)明傳染性物品。當(dāng)有液體傳染性廢物時,應(yīng)確保容器無泄漏。
3.處置傳染性廢物
傳染性廢物的處置是一個減少或限制其潛在致病性的過程。滅菌和焚燒是最常用的處理方法。處置的主要目的是消除污染,將病源數(shù)量降低到致病水平以下。
3.1壓力蒸汽滅菌
3.2干熱處理
3.3氣體滅菌
3.4化學(xué)消毒
4儲存?zhèn)魅拘詮U物
4.1確保包裝內(nèi)容物不暴露于空氣和潮濕;
4.2保存溫度和時間應(yīng)使保存物不腐敗,必要時可采用低溫保存,防止微生物生長和異味;
4.3儲存和包裝應(yīng)確保內(nèi)容物不成為老鼠或其他生物的食物來源;
4.不允許向公眾開放儲存場所。

PCR實驗室效果圖 PCR實驗室效果圖
   

三.PCR實驗室制備和擴(kuò)增區(qū)域操作規(guī)范

PCR實驗室制備和擴(kuò)增區(qū)域操作規(guī)范
這個區(qū)域的主要操作是DNA或cDNA擴(kuò)大。此外,已制備的DNA合成模板cDNA(來自樣品制備區(qū))添加和主反應(yīng)混合物(來自試劑儲存和制備區(qū))制備反應(yīng)混合物也可在本區(qū)進(jìn)行。PCR在測量中,反應(yīng)管通常必須在第一輪擴(kuò)增后打開,因此巢式擴(kuò)增具有較高的污染風(fēng)險,第二次加樣必須在該區(qū)域進(jìn)行。
區(qū)域的壓力梯度要求為:相對于相鄰區(qū)域的負(fù)壓,以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。為了避免氣溶膠造成的污染,應(yīng)盡量減少該區(qū)域不必要的行走。應(yīng)在超凈平臺上進(jìn)行添加樣品等個人操作。

PCR實驗室效果圖 PCR實驗室效果圖
   

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