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PCR實驗室系統(tǒng)設計,維護保養(yǎng)

  • Jason Peng

  • Product Manager for PCR實驗室系統(tǒng)設計,維護保養(yǎng),Engaged in related product development for 15 years,with a wealth of related technical experience

  • 2022-12-15  |  Visits:


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pcr實驗室設計

PCR實驗室主要實驗項目:病毒檢測,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫(yī)物證等等。
PCR實驗室建設原則上分為四個單獨的工作區(qū)域:試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。
1、試劑準備區(qū):用于試驗試劑的準備。
該區(qū)域為正壓,目的是防止污染物質(zhì)溢入。該區(qū)域內(nèi)部又可分為3個區(qū)域:普通提取試劑的準備區(qū)、PCR試劑準備區(qū)和PCR主反應液準備區(qū)。在普通提取試劑的準備區(qū)內(nèi)準備一些樣品核酸提取時所需的裂解液、提取液等;PCR試劑準備區(qū)用于PCR試劑的制備和保存。例如準備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染,避免反復冷凍和解凍,試劑存貯溶液應該被平均為小的工作體積,儲存在這個房間以備后用:PCR主反應液準備區(qū)將進行主反應混合液(除了樣品。所有PCR所需試劑的混合)添加到PCR管的操作。重要提示:不能將其它房間的材料(包括擴增、模板和目標核酸或陽性對照、供應品、或設備)帶進試劑準備區(qū)。
2、樣品準備區(qū):該區(qū)域無壓力設置要求。
該區(qū)域是用于對樣品進行分樣,將樣品進行研磨、粉碎、勻漿的區(qū)域。由于在這些粉碎、研磨和勻漿處理過程中會產(chǎn)生氣溶膠,因此,存在陽性樣品污染后續(xù)操作的可能性。該區(qū)域與后面的區(qū)域應嚴格隔離,應放在與后面的三個區(qū)域隔開的獨立的房間中。在樣品準備區(qū)內(nèi)還可設立一個專用的封閉區(qū)或房間用于樣品的接收和儲存。這個房間可以放置冰箱用于樣品儲存,應該和樣品準備區(qū)其它區(qū)域隔離開。樣品準備區(qū)域的人員不得進入試劑準備區(qū)。
3、核酸提取區(qū):核酸提取區(qū)是進行樣品核酸提取的區(qū)域。
該區(qū)域為負壓,目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準備區(qū)又包括從樣品中進行核酸提取和純化的區(qū)域以及將核酸加到包含PCR主反應混合液管中的操作區(qū)域。添加完樣品后,PCR管的蓋子要盡可能快地蓋好。使用PCR板和膠蓋時,陽性對照和含目標序列的樣品要與待測樣本分開操作,以避免模板添加時造成交叉污染
重要提示:這個房間里的一切物品不得帶人試劑準備區(qū)。
4、擴增和產(chǎn)品檢測區(qū):該區(qū)域是用來進行PCR擴增和PCR分析。
PER儀放置在這個區(qū)域。房間保持負壓,目的是防止核酸溢出。在該區(qū)域人員一定要一直穿戴工作服和手套,在離開房間前脫去,防止擴增子污染其它地點。所有用于擴增和產(chǎn)品檢測的設備要指定用于這個房間。PCR分析]二作也設置在該區(qū)域,例如:酶切、測序、克隆等,但實驗室應盡可能把這些活動分隔在不同區(qū)域或不同房間。以降低擴增產(chǎn)物的污染風險。如果沒有條件在該區(qū)域設立負壓,此區(qū)域必須建立排風裝置。

PCR實驗室設計效果圖 PCR實驗室設計效果圖
   

PCR實驗室在設計中應該注重什么呢?

實驗室可分為兩大功能工作區(qū):核酸擴增前區(qū)和核酸擴增后區(qū)。
核酸擴增前區(qū)域包括試劑制備室和樣品制備室。兩個房間各自獨立,沒有任何空氣互通。兩個房間相對于外部空氣壓力處于正壓狀態(tài)。核酸擴增后區(qū)域包括擴增區(qū) 域和產(chǎn)物分析區(qū)域,其可以使用實時熒光PCR儀器、 HIV病毒載量測定器的PCR實驗室組合成一個房間。如果該區(qū)域分為兩個房間,則兩個房間也必須各自獨立,不 能有空中互通。后擴增區(qū)對外部空氣壓力處負壓狀態(tài)。
實驗室根據(jù)儀器的功能設置各種工作區(qū)域。例如,使用聚合酶聯(lián)反應:設置試劑儲存和準備區(qū)域、標本制備區(qū)域、擴增區(qū)域、擴增產(chǎn)物分析區(qū)域四個獨立的工作 區(qū)域,這是最常用的分區(qū)方法。如果需要粉碎樣品,則需要添加樣品破碎區(qū);如果使用實時熒光PCR法:基因擴增區(qū)域、基因產(chǎn)物分析區(qū)域可以組合在一個房間;采用 標本處理、核酸提取和擴增檢測為一體的自動PCR分析儀,則樣品制備區(qū)域、擴增區(qū)域、擴增產(chǎn)物分析區(qū)域可以組合成一個區(qū)域,因此PCR實驗室原則上設置五個區(qū) 域或四個區(qū)域或三個區(qū)域或兩個獨立的工作區(qū)域。
實驗室設備是保障工作質(zhì)量不可或缺的配置。在PCR實驗室設計中,應根據(jù)每個實驗室的要求提供不同的儀器和設備,如:離心機、生物安全柜、超潔凈工作臺、電泳(插槽)、電轉(zhuǎn)儀、雜交箱、水浴箱、 DNA測序儀、酶標儀和洗板機等等。
實驗室作為一種分子生物學技術,可以放大DNA片段,利用DNA基因跟蹤系統(tǒng)更快,更準確地檢測人體內(nèi)的病毒含量。它為醫(yī)學治療提供可靠依據(jù),為人們帶來了先進的、快速的、高效的醫(yī)療依據(jù)。

PCR實驗室設計效果圖 PCR實驗室設計效果圖
   

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